產(chǎn)品簡(jiǎn)介
2×FastTaq Premix 是將 PCR 反應(yīng)中用到的 FastTaq DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 以及穩(wěn)
定劑以 2 倍的終濃度進(jìn)行混合。 使用時(shí)，只需在制品溶液中加入模板和引物便可進(jìn)行 PCR 反應(yīng)，
大大簡(jiǎn)化了操作過程，降低了 PCR 操作過程中污染的可能性。同 Taq 酶一樣，使用本品擴(kuò)增得到
的 PCR 產(chǎn)物的 3'端也附有一個(gè)"A"堿基，因此，也可直接用于 T-A 克隆。 針對(duì)目標(biāo) PCR 產(chǎn)物在 1.5
Kb 以下時(shí)，本 Taq 酶支持 1 s 超快 PCR 延伸程序（72 度延伸程序僅需 1 s）。
產(chǎn)品組成
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無染料 |
21401-1 |
21401-2 |
21401-3 |
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2×FastTaq Premix |
10 mL |
100 mL |
1 L |
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含染料 |
21411-1 |
21411-2 |
21411-3 |
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2×FastTaq Premix |
10 mL |
100 mL |
1 L |
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(with dye) |
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預(yù)混液應(yīng)置于-20 ℃保存，應(yīng)避免反復(fù)凍融。貨號(hào) 21401-2 為 100 支每盒裝。
PCR 反應(yīng)體系：
1. 在冰浴上設(shè)置 PCR 反應(yīng)（供參考）*：
模板: < 500 ng
2× FastTaq Premix: 25 μL
Primer 1/2: 0.2 - 1.0 μM (終濃度)
滅菌蒸餾水 Up to 50 μL
(臨時(shí)保存): 16 ℃ 保溫
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2. PCR 反應(yīng)參數(shù)（供參考）**：
(起始變性): 95 ℃ 5 -10 min
(解鏈): 95 ℃ 30 sec
(退火): 55 ℃ 30 sec
(延伸 30-35 循環(huán)): 2 kb/min 或 1 s 延伸
(超快延伸僅適用于產(chǎn)物＜1.5kb 時(shí)）
(最終延伸): 72 ℃ 10 min
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* 針對(duì)不同類型的模板，所需的模板量會(huì)有不同，如基因組和質(zhì)粒，等等；需要根據(jù)實(shí)際情況，添加合
適的模板量。** 退火溫度需根據(jù)引物和模板實(shí)際的 G+C 含量來作調(diào)整；針對(duì)高 GC 模板，可適當(dāng)添加
DMSO 至 5%-10%。
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